सिटू हायब्रीडायझेशनमध्ये फ्लूरोसन्स

डीएनए शोधण्यासाठी सिटू हायब्रीडायझेशन (एफआयएसएच) मध्ये फ्लूरोसन्स ही अनुवांशिक तपासणी पद्धत आहे.डीऑक्सिरीबोन्यूक्लिक acidसिड) वैयक्तिक पेशींच्या नाभिकात.

या पद्धतीमध्ये विशिष्ट डीएनए प्रोबचा वापर आहे जे केवळ जीनोमिक प्रदेशांबद्दल माहिती प्रदान करू शकते ज्यासाठी वापरलेली तपासणी विशिष्ट आहे.

संकेत (अनुप्रयोगाची क्षेत्रे)

  • संख्यात्मक गुणसूत्र कमी होण्याची शंकाः
    • संख्यात्मक गुणसूत्र विकृती (उदा. ट्रायसोमी 21) शोधणे.
    • गुणसूत्र विकृतींसाठी मोज़ाइकच्या प्रमाणीकरणासाठी (उदा. अल्लरिक मध्ये-टर्नर सिंड्रोम).
  • मायक्रोडेलेलेशन शोध (उदा. मोनोसोमी 22 क 11.2).
  • गुणसूत्र विकृती शोधणे (उदा. तीव्र लिम्फोसाइटिक ल्युकेमिया (सीएलएल), नॉन-हॉजकिन लिम्फोमा).

वरील संकेतांचे विश्लेषण इंटरफेस एफआयएसएच द्वारे केले आहे (तपशीलांसाठी “प्रयोगशाळा प्रक्रिया” पहा)

प्रक्रिया

आवश्यक साहित्य

  • हेपरिन रक्त (किमान 1-2 मिली)

रुग्णाची तयारी

  • गरज नाही

विघटनकारी घटक

  • काहीही ज्ञात नाही

प्रयोगशाळा पद्धत

सिटू हायब्रीडायझेशन (एफआयएसएच) मधील प्रतिदीप्तिमध्ये फ्लूरोसेन्टली लेबल केलेल्या डीएनए प्रोब (फिश प्रोब) चा समावेश आहे. हे गुणसूत्रांवरील विशिष्ट डीएनए साइटवर बांधले जाऊ शकतात, ज्यास संकरित म्हणतात. फ्लोरोसेंटली लेबल केलेल्या तपासणीस बंधनकारक केल्यानंतर किंवा नंतर, मूल्यमापन मायक्रोस्कोपद्वारे केले जाऊ शकते. या प्रक्रियेमध्ये, इंटरफेस न्यूक्लियातील फ्लूरोसीन्स सिग्नल्सची संख्या निश्चित केली जाते. या व्यतिरिक्त, मेटाफेसवर स्थानाचे मूल्यांकन (उदा. लिप्यंतरण / स्थानाचे स्थानांतरण / दुसर्‍या गुणसूत्राकडे) गुणसूत्र शक्य आहे.

जेव्हा भिन्न फ्लोरोसेंट रंग फिश प्रक्रियेत वेगवेगळ्या लक्ष्य डीएनएसाठी वापरले जाते, त्याला मल्टीकलर फिश म्हटले जाते. हे जीनोमच्या पूर्ण दृश्यासाठी परवानगी देते.

काही प्रकरणांमध्ये, डीएनए प्रोब थेट फ्लूरोसेंट डाईने लेबल केले जात नाही, ज्यास अप्रत्यक्ष प्रक्रिया म्हणतात. त्याऐवजी, यासारख्या पदार्थासह ते लेबल केलेले आहे पूर्वीचे जीवनसत्व एच् आता ते बी कॉम्प्लेक्स जीवनसत्वाचा एक भाग गणले जाते किंवा डिगॉक्सिनिन. ही पद्धत अधिक क्लिष्ट मानली जाते परंतु ती अधिक संवेदनशील आहे.