डीएनए क्रमवारत
डीएनए सिक्वेन्सिंगमध्ये, डीएनए रेणूमधील न्यूक्लियोटाइड्स (साखर आणि फॉस्फेटसह डीएनए बेस रेणू) चा क्रम निश्चित करण्यासाठी बायोकेमिकल पद्धती वापरल्या जातात. सेंगर चेन टर्मिनेशन पद्धत ही सर्वात जास्त वापरली जाणारी पद्धत आहे. डीएनए चार वेगवेगळ्या आधारांनी बनलेला असल्याने, चार भिन्न दृष्टिकोन तयार केले जातात.
प्रत्येक पध्दतीमध्ये अनुक्रमित डीएनए, एक प्राइमर (अनुक्रमासाठी सुरू होणारा रेणू), डीएनए पॉलिमरेझ (डीएनएचा विस्तार करणारे एन्झाइम) आणि चारही आवश्यक न्यूक्लियोटाइड्सचे मिश्रण असते. तथापि, या चार पध्दतींपैकी प्रत्येकामध्ये भिन्न आधार रासायनिक रीतीने अशा प्रकारे सुधारित केला जातो की तो समाविष्ट केला जाऊ शकतो परंतु DNA पॉलिमरेझसाठी क्रिया बिंदू प्रदान करत नाही. यामुळे साखळी संपुष्टात येते. ही पद्धत वेगवेगळ्या लांबीचे डीएनए तुकडे तयार करते, जे नंतर त्यांच्या लांबीनुसार तथाकथित जेल इलेक्ट्रोफोरेसीसद्वारे रासायनिकरित्या वेगळे केले जातात. परिणामी क्रमवारी प्रत्येक बेसला वेगळ्या फ्लोरोसेंट रंगाने लेबल करून अनुक्रमित डीएनए विभागातील न्यूक्लियोटाइड्सच्या अनुक्रमात अनुवादित केले जाऊ शकते.
डीएनए हायब्रिडायझेशन
डीएनए संकरीकरण ही एक आण्विक अनुवांशिक पद्धत आहे जी भिन्न उत्पत्तीच्या डीएनएच्या दोन एकल स्ट्रँडमधील समानता सिद्ध करण्यासाठी वापरली जाते. ही पद्धत डीएनए डबल स्ट्रँड नेहमी दोन पूरक सिंगल स्ट्रँडने बनलेली असते या वस्तुस्थितीचा उपयोग करते. दोन्ही सिंगल स्ट्रँड्स एकमेकांशी जितके जास्त समान असतील तितके जास्त बेस विरुद्ध बेससह घन जोडणी (हायड्रोजन बंध) तयार करतात किंवा अधिक बेस जोड्या तयार होतात.
भिन्न बेस अनुक्रम असलेल्या दोन DNA स्ट्रँडवरील विभागांमध्ये कोणतेही बेस पेअरिंग होणार नाही. संयुगांची सापेक्ष संख्या आता वितळण्याचा बिंदू ठरवून निर्धारित केली जाऊ शकते ज्यावर नव्याने तयार झालेला DNA दुहेरी स्ट्रँड विभक्त झाला आहे. वितळण्याचा बिंदू जितका जास्त असेल तितके अधिक पूरक तळ एकमेकांना हायड्रोजन बंध तयार करतात आणि दोन एकल स्ट्रँड जितके जास्त समान असतात. या पद्धतीचा वापर डीएनए मिश्रणातील विशिष्ट आधार अनुक्रम शोधण्यासाठी देखील केला जाऊ शकतो. या उद्देशासाठी, कृत्रिमरित्या तयार केलेल्या डीएनए तुकड्यांना (फ्लोरोसंट) डाईने लेबल केले जाऊ शकते. हे नंतर संबंधित बेस अनुक्रम चिन्हांकित करण्यासाठी सर्व्ह करतात आणि अशा प्रकारे ते दृश्यमान करू शकतात.
या मालिकेतील सर्व लेखः
