एकल-जीन विश्लेषण ही एक लक्ष्यित अनुवांशिक चाचणी पद्धत आहे.
या प्रक्रियेच्या चौकटीत, एखाद्या आनुवंशिक रोगाचा संशय असल्यास, जो एका बदलामुळे उद्भवतो. जीन, कारण म्हणून संशयित जनुकाची तपासणी केली जाते. हे स्क्रिनिंग परीक्षांचा भाग म्हणून नियमितपणे देखील केले जाते.
संकेत (अनुप्रयोगाची क्षेत्रे)
- मोनोजेनिक रोगांचे निदान उदा सिस्टिक फायब्रोसिस.
प्रक्रिया
आवश्यक साहित्य
- हेपरिन रक्त (किमान 1-2 मिली)
रुग्णाची तयारी
- गरज नाही
विघटनकारी घटक
- काहीही ज्ञात नाही
प्रयोगशाळा पद्धत
बहुतेकदा, एकल- मध्ये वापरलेली अनुक्रम पद्धतजीन विश्लेषण ही सेंगर पद्धत आहे, ज्याला चेन टर्मिनेशन सिंथेसिस देखील म्हणतात, जिथे ते प्रथम डीएनएच्या विलगीकरणावर येते. रक्त. मग, सर्व हायड्रोजन दोन-अडकलेल्या डीएनएला एकत्र ठेवण्याचे काम करणारे बंध तुटलेले आहेत. एका मिनिटासाठी 94-96 °C वर गरम केल्यानंतर, दोन एकल स्ट्रँड्स उपस्थित असतात. पुढे, तथाकथित प्राइमर हायब्रिडायझेशन होते, ज्याद्वारे प्राइमर जोडला जातो. हे सुमारे 60 डिग्री सेल्सिअस तापमानात होते. प्राइमर हे ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड (काही न्यूक्लियोटाइड्सचे बनलेले ऑलिगोमर्स) आहे जे डीएनए-प्रतिकृतीसाठी प्रारंभ बिंदू म्हणून काम करते एन्झाईम्स जसे की डीएनए पॉलिमरेझ. प्राइमर हायब्रिडायझेशननंतर, विस्तार होतो, ज्यामध्ये तापमान 72 डिग्री सेल्सियस पर्यंत वाढवले जाते. हे प्राइमरला डीएनए पॉलिमरेझशी संलग्न करण्यास अनुमती देते (एन्झाईम्स जे डीएनएचे संश्लेषण करतात). सरासरी 30 चक्रांनंतर, प्रक्रिया थांबविली जाऊ शकते.
पुढील विश्लेषण द्वारे केले जाते केशिका स्वयंचलित अनुक्रमांमध्ये इलेक्ट्रोफोरेसीस. परिणामाला इलेक्ट्रोफेरोग्राम म्हणतात. हे मूळ क्रम दर्शविणारे भिन्न रंग दर्शविते.
या पद्धतीद्वारे, जनुकामध्ये फक्त एकाच न्यूक्लिक बेसचा समावेश असलेले उत्परिवर्तन, ज्याला बिंदू उत्परिवर्तन देखील म्हणतात, शोधले जाऊ शकतात.
